Mestrado em Engenharia Biotecnológica

URI permanente para esta coleção:

http://hdl.handle.net/10437/10758

Navegar

Percorrer Mestrado em Engenharia Biotecnológica por autor "Diniz, Patrícia Ribeiro Leal da Silva"

A mostrar 1 - 1 de 1
  • Item
    Aspectos da patogenia da piómetra na cadela : fímbrias tipo 1 de escherichia coli e mecanismos de defesa no endométrio
    (2017) Diniz, Patrícia Ribeiro Leal da Silva; Charmier, Maria Adília Januário, orient.
    Piómetra é uma doença do foro reprodutivo comum em cadelas sendo Escherichia coli a bactéria mais frequentemente isolada. Neste estudo estabelecemos dois objectivos distintos: a) avaliar a capacidade de E. coli associada a piómetra para transcrever os genes fim e expressar fímbrias tipo 1; b) estudar a resposta imune inata do endométrio, sob a forma de explantes, após estimulação com E. coli. De modo a determinar se os genes fim são transcritos, a orientação (On/Off) do elemento de ADN que contém o promotor e conduz à transcrição dos genes fim, foi determinada por amplificação da região do promotor por PCR, seguida da digestão com a enzima HinfI. Para tal, foram efectuados ensaios em três condições de cultura; agar, arejada, estática. Os resultados mostraram que a maioria dos isolados tem a capacidade de mudar da posição Off para a posição On. Em agar, a posição Off foi predominante (60% dos isolados) e 40% dos isolados apresentaram uma mistura de células na posição On e Off. Na cultura arejada, 80% dos isolados tinham células em posições On e Off e 20% estavam na posição Off. Na cultura estática, a maioria dos isolados (67%) tinha células nas posições On e Off e 7% mudaram completamente para a posição On. Neste estudo demonstrámos ainda que os isolados de E. coli associados a piómetra têm a capacidade de expressar fimbrias tipo 1, uma vez que aglutinam células de levedura. No que se refere ao primeiro objectivo, concluímos que os isolados de E. coli de piómetra têm a capacidade de transcrever genes fim e expressar fimbrias tipo 1. No entanto, a transcrição e expressão estão dependentes de estímulo ambiental. Quanto ao segundo objectivo, mostrámos que os explantes endometriais estimulados com E. coli transcrevem genes que codificam para mediadores de inflamação. Os níveis de transcrição dos genes que codificam para o TNFα, IL-6 e CXCL10 foram significativamente mais elevados em explantes estimulados com E. coli., comparativamente a explantes não estimulados. Por outro lado, a transcrição do gene IL-1β foi menor nos explantes estimulados. Estes resultados demonstram que os explantes de endométrio foram capazes de montar uma resposta imunitária.