Exosome analysis in culture medium of human blastocysts retrieved post-invasive trophectoderm biopsy : potential use as biomarkers for embryonic viability

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dc.contributor.authorLourenço, Mariana Belchior
dc.contributor.institutionEscola de Psicologia e Ciências da Vida
dc.contributor.supervisorGOMES, BRUNO DANIEL DA COSTA
dc.contributor.supervisorMIGUEL, IGNACIO SANTIAGO ALVAREZ
dc.date.accessioned2025-03-12T16:40:06Z
dc.date.available2025-03-12T16:40:06Z
dc.date.issued2024
dc.description.abstractA seleção eficaz de embriões é fundamental para melhorar as taxas de gravidez clínica em tratamentos de reprodução assistida (TRA). Apesar dos critérios de seleção convencionais, baseados na morfocinética ou no estado cromossómico, persiste o desafio de garantir uma implantação bem-sucedida, mesmo com embriões euploides de alta qualidade. A produção de vesículas extracelulares por blastocistos in vitro foi associada ao processo de implantação, contudo, nenhum estudo semelhante investigou embriões após biopsia para teste genético pré-implantacional (PGT-A). Este estudo explora o secretoma embrionário como fonte potencial de biomarcadores não invasivos para identificar embriões de excelência adequados para transferência. Pela primeira vez, foram analisadas variações na composição molecular do secretoma antes e após a vitrificação de blastocistos humanos submetidos a PGT-A. Utilizando a análise de imunofluorescência (Leprechaun), identificaram-se exossomas específicos no secretoma embrionário, enriquecidos em tetraspaninas CD9, CD63 e/ou CD81, contendo fatores relacionados à pluripotência, implantação e apoptose. Observou-se tendencialmente, no meio de cultura de embriões aneuploides um maior número de vesículas. Além disso, verificou-se que no meio de embriões euploides que resultaram em gravidez clínica apresentou mais vesículas HLA-G, fator associado à implantação, comparando com embriões não implantados. Resultados, estes, promissores na previsão da viabilidade e da probabilidade de implantação embrionária bem-sucedida, visando aprimorar as taxas de obtenção de gravidez clínica em TRA. Plavras-chave: Teste Genético pré-implantacional (PGT); Blastocistos Humanos; Exossomas (Exo); Tetraspaninas; Biomarcadores.pt
dc.description.abstractEffective embryo selection is crucial to enhance clinical pregnancy rates in assisted reproductive treatments (ART). Despite conventional selection criteria, based on morphokinetics or chromosomal status, the challenge of ensuring successful implantation persists, even with high-quality euploid embryos. Extracellular vesicles (EVs) production by in vitro-produced blastocysts has been correlated with the implantation process; however, no similar studies have been conducted on embryos following biopsy for preimplantation genetic testing for aneuploidy (PGT-A). This study explores the embryonic secretome as a potential source of non-invasive biomarkers to identify suitable excellence embryos for transfer. First-ever, variations in the molecular composition of the secretome before and after vitrification of human blastocysts submitted to PGT-A were analysed. Using immunofluorescence analysis (Leprechaun machine), specific exosomes (Exo) in the embryonic secretome, enriched in CD9, CD63 and/or CD81 tetraspanins, were identified, containing factors related to pluripotency, implantation, and apoptosis. A tendency was observed for aneuploid embryo spent culture media to contain more vesicles. Additionally, spent media from euploid embryos resulting in clinical pregnancy showed a higher number of HLA-G vesicles, an implantation-associated factor, compared to non-implanting embryos. These results hold promise for predicting the viability and likelihood of successful embryo implantation, aiming to improve clinical pregnancy rates in ART. Keywords: Preimplantation Genetic Testing (PGT); Human Blastocysts; Exosomes (Exo); Tetraspanins; Biomarkersen
dc.formatapplication/pdf
dc.identifier.tid203675797
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10437/15119
dc.language.isoeng
dc.rightsopenAccess
dc.subjectMEDICINE
dc.subjectEMBRYOLOGY
dc.subjectHUMAN REPRODUCTION
dc.subjectGENETIC TESTING
dc.subjectEMBRYO
dc.subjectBIOMARKERS
dc.subjectFLUORESCENT ANTIBODY TECHNIQUE
dc.subjectINFERTILITY
dc.subjectASSISTED REPRODUCTIVE TECHNOLOGY
dc.subjectMESTRADO EM EMBRIOLOGIA E REPRODUÇÃO HUMANA
dc.subjectMEDICINA
dc.subjectEMBRIOLOGIA
dc.subjectREPRODUÇÃO HUMANA
dc.subjectTESTES GENÉTICOS
dc.subjectEMBRIÃO
dc.subjectBIOMARCADORES
dc.subjectIMUNOFLUORESCÊNCIA
dc.subjectINFERTILIDADE
dc.subjectREPRODUÇÃO MEDICAMENTE ASSISTIDA
dc.subjectMestrado em Embriologia e Reprodução Humana
dc.titleExosome analysis in culture medium of human blastocysts retrieved post-invasive trophectoderm biopsy : potential use as biomarkers for embryonic viabilityen
dc.typemasterThesis

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